◆单抗筛选实验方案
1.材料及方法:将经免疫过的小鼠的脾细胞与SP2/0细胞进行融合,融合使用HAT培养基,融合后培养10天,观察克隆大小及细胞融合效果,并进行杂交瘤阳性克隆的筛选,血清浓度设置10%、15%、20%三个梯度进行实验。
◆实验结果
2.1细胞融合后第三天形态观察结果
Royacel (10%) | Royacel (15%) | Royacel (20%) |
对照(10%) | 对照(15%) | 对照 (20%) |
2.2融合初筛结果
2.3第一次亚克隆第四天形态观察结果
Royacel (10%) | Royacel (15%) | Royacel (20%) |
对照(10%) | 对照(15%) | 对照 (20%) |
2.4第二次亚克隆第二天形态观察结果
Royacel (10%) | Royacel (15%) | Royacel (20%) |
对照(10%) | 对照(15%) | 对照 (20%) |
◆结果分析
细胞融合初筛结果显示:血清浓度为10%时,Royacel融合细胞存活率与对照无差异,Royacel融合细胞阳性率高出对照13%,Royacel高产细胞数较对照略高;血清浓度为15%和20%时,融合细胞存活率、高产细胞数与对照无明显差异;
Royacel单抗制备专用胎牛血清用于单抗筛选时与对照血清无明显差异。