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Vero细胞连续传代及生长曲线实验

时间:2020-04-29

◆连续传代培养实验

1. 材料及方法:细胞1:6分种,72小时传代,连续6代培养。MEM培养基,8%血清,37℃培养,T25培养瓶,对照为澳洲胎牛血清;

2. 实验结果

2.1细胞形态

对照(第六代72小时)

Royacel(第六代72小时)

2.2 细胞计数

◆生长曲线实验

1. 材料及方法:以2×104个/ml细胞浓度接种8个T25方瓶,每天取1瓶计数,绘制细胞生长曲线,三批次产品分别做三次实验,每个时间点的细胞密度取平均值,绘制曲线。澳洲胎牛血清为每次实验对照血清。

2. 实验结果

◆结果分析

1. 细胞连续六次传代,第六代72小时,Royacel与对照血清培养的Vero细胞铺满率均达到98%。细胞界线清晰,干净整齐;细胞计数结果表明经连续六次传代后Royacel细胞密度高出对照12%,这是一个6次传代累积的结果,实际每代细胞密度差别应该小于10%。两个血清在细胞活率上没有差异;

2. 通过生长曲线可知:Royacel 胎牛血清和对照血清(使用同一批次做对照)细胞增殖和维持方面差别不大。Royacel胎牛血清各批次间细胞倍增时间及峰值浓度的偏差均<10%。不同批次血清,观察Vero细胞增殖和维持能力无明显差异;

Royacel 胎牛血清在Vero细胞培养方面具有良好的稳定性。

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