KMB-17细胞培养综合评价实验

◆实验目的：对KMB-17细胞用血清进行细胞培养综合评价

◆实验方案

◆实验结果

A.贴壁能力测试：

评价：连续6次传代，每代观察贴壁情况，结果表明：对照血清在接种后两小时，贴壁细胞数量较少，贴壁后细胞展开较为充分；荣晔生物新生牛血清在接种后两小时，贴壁细胞数量多，贴壁后细胞展开充分，荣晔生物新生牛血清促KMB-17细胞贴壁能力优于对照血清。

B.细胞形态、增殖能力、连续传代能力：

评价：

细胞形态：对照在连续6次传代培养中，从第三代开始细胞整齐度变差，第四代以后出现少量颗粒物，且细胞间隙变大，第六代时死细胞增加，出现老化迹象，饱满程度略差；荣晔生物新生牛血清在连续6次传代培养中，细胞饱满且立体感强，界线清晰，整齐干净。结果表明荣晔生物新生牛血清培养KMB-17细胞具有良好的细胞形态，优于对照。

增殖能力：通过汇合率观察和细胞计数结果，可知在连续6次传代过程中，荣晔生物新生牛血清促细胞增殖能力优于对照，第三代时细胞密度高于对照52.8%，第六代时细胞密度高于对照100%。

连续传代能力：连续传代过程中，对照在第三代以后生长速度变慢，到第六时密度降低29.3%，死细胞增加，形态出现老化迹象，而荣晔生物新生牛血清细胞密度差异＜10%，细胞形态无明显差异。结果表明荣晔生物新生牛血清连续传代能力稳定，细胞老化慢，连续传代能力优于对照。

C.细胞维持能力：

评价：不换液连续培养12天，对照细胞间隙较大，有较多空斑，饱满程度较差，第六代时优于细胞密度低，表现略好；荣晔生物新生牛血清细胞饱满立体感强、界线清晰，致密整齐。同时考虑到荣晔生物新生牛血清细胞密度高于对照，细胞维持难度更大，可知荣晔生物新生牛血清细胞维持能力明显优于对照。

D.生长曲线：

评价:由生长曲线可知:对照与荣晔生物新生牛血清支持低浓度KMB-17细胞增殖能力基本相当,倍增时间相近;对照前期效果略优于荣晔生物新生牛血清,而荣晔生物新生牛血清后期效果优于对照;荣晔生物新生牛血清峰值浓度为18.59×104个/ml高于对照峰值浓度(17.34×104个/ml)。

◆实验结论：通过贴壁能力、细胞形态、增殖能力、连续传代能力、细胞维持能力及生长曲线测定综合评价，实验结果表明：荣晔生物新生牛血清培养KMB-17细胞能力优于对照。